Η αρχαιολογική έρευνα, στην περιοχή της Αμφίπολης, έχει αποκαλύψει ερείπια ανθρώπινης εγκατάστασης που χρονολογούνται γύρω στο 3.000 π.Χ.
480 π.Χ.
O Ξέρξης περνώντας από την περιοχή έθαψε ζωντανούς εννέα νεαρούς άντρες και εννέα παρθένες ως θυσία σε ποτάμιο θεό.
479 π.Χ.
Στην σημερινή Αμφίπολη ο βασιλιάς της Μακεδονίας Αλέξανδρος Α΄ νίκησε τα υπολείμματα του στρατού του Ξέρξη.
465 π.Χ.
Γίνεται η πρώτη απόπειρα της Αθήνας να αποικήσει την περιοχή απέτυχε. Θράκες πελταστές (είδος αρχαίου πολεμιστή) συνέτριψαν στον Δραβήσκο (μία περιοχή 10 περίπου χιλίομετρα από την Αμφίπολη) την οπλιτική φάλαγγα 2.500-3.000 Αθηναίων αποίκων της πόλης των Εννέα Οδών, οι οποίοι προχωρούσαν στη θρακική ενδοχώρα με σκοπό την κατάληψη των προσοδοφόρων χρυσωρυχείων της.
ΙΔΡΥΣΗ ΤΗΣ ΑΜΦΙΠΟΛΗΣ
437 π.Χ.
Οι Αθηναίοι κατάφεραν τελικά να εγκατασταθούν στην περιοχή και ίδρυσαν την Αμφίπολη.
431 π.Χ.
Η Αμφίπολη πέρασε στα χέρια των Σπαρτιατών κατά τη διάρκεια της πρώτης φάσης του Πελοποννησιακού πολέμου.
Η Νικίειος Ειρήνη (συνθήκη ειρήνης μεταξύ Αθηναϊκης και Πελοποννησιακής Συμμαχίας) προέβλεπε να αποδοθεί στους Αθηναίους η Αμφίπολη το 422 π.Χ., μια υπόσχεση που δεν υλοποιήθηκε. Έτσι η Αμφίπολη έμεινε στην επιρροή των Σπαρτιατών. Μια τελευταία προσπάθεια ανάκτησή της από τους Αθηναίους έγινε το 358 π.Χ. όμως απέτυχε.
Τον επόμενο χρόνο...
359 π.Χ.
O Φίλιππος Β’ ο πατέρας του Μεγάλου Αλεξάνδρου κατέκτησε την Αμφίπολη και την έκανε μέρος του Βασιλείου των Μακεδόνων.
Μέχρι και την πτώση του Μακεδονικού Βασιλείου από τους Ρωμαίους, η Αμφίπολη άκμασε οικονομικά και πολιτιστικά.
215-148 π.Χ.
Κατά τους Μακεδονικούς Πολέμους το βασίλειο της Μακεδονίας έχασε την κυριαρχία του στην Αμφίπολη, από τους Ρωμαίους.
Η Αμφίπολη έγινε μέρος της Ρωμαϊκής Αυτοκρατορίας. Από την πόλη διερχόταν η περίφημη Εγνατία οδός.
